La historia es más grande que la propia realidad, y dos veces más divertida, en esta monumental secuela que es todavía más divertida que la original, Ben Stiller lidera un reparto estelar (incluyendo a Amy Adams, Owen Wilson, Hank Azaria y Robin Williams) en el papel de Larry Daley, un antiguo vigilante nocturno del Museo de Historia Natural, donde las figuras cobran vida al caer la noche. En esta ocasión los amigos nocturnos de Larry son retirados del museo y llevados a los archivos del Instituto Smithsonian, desde donde llaman a Larry para que les ayude en un divertido y trepidante enfrentamiento contra un antipático faraón egipcio que planea apoderarse del museo... ¡y del mundo!
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